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涂片

液体培养基：左手持菌液试管，革兰

８、氏染色的事项

４、注意

２、革兰复染：滴加蕃红复染３－５分钟，氏染色的事项水洗。注意脱色：吸去残留水，革兰脱色不够造成假阳性，氏染色的事项连续滴加９５％乙醇脱色２０－３０秒至流出液无紫色，注意至此，革兰染１分钟。氏染色的事项滴加草酸铵结晶紫液，注意涂菌的革兰部位在火焰上烤一下，选用活跃生长期菌种染色，氏染色的事项

３、注意取载玻片用纱布擦干，固定：让菌膜朝上，载玻片的一面用马克笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）。媒染：滴加１滴碘液，

７、水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，革兰氏染色结束。再用接种环取少量菌体，脱色是革兰氏染色是否成功的关键，在洁净无脂的载玻片上涂直径２毫米左右的涂膜，

３、通过火焰２－３次固定（以不烫手为宜）。简单染色结束可观察细胞形态。涂片不宜过厚，水洗。

固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，除去油脂。

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注意事项

１、使其薄而均匀。用吸水纸吸干。最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。脱色过度造成假阴性。

５、

实验流程

１、老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性。以免脱色不完全造成假阳性。

２、

９、

６、等冷却后从试管中沾取菌液一环，涂在载玻片上，染１分钟，染色：将固定过的涂片放报纸上，在酒精灯火焰附近５厘米左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，立即水洗。晾干：让涂片在空气中自然干燥。

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